A kontroll antitestek betöltése fontos kontrollok, mivel jelzik a minták egyenlő betöltését az összes lyukba. A betöltési kontrollok a fehérjék megfelelő átvitelét is jelzik a membránba a Western-blot-folyamat során. A betöltési kontrollok jellemzően magas és mindenütt jelen lévő fehérjék.
Mit csinál a betöltésvezérlő?
A betöltési kontroll egy Western-blot kísérletben kontrollként használt fehérje. … Használják őket annak biztosítására, hogy a fehérje egyenlően legyen betöltve az összes lyukba.
Miért használunk betöltésvezérlőt a Western blotban?
A betöltési vezérlőknek van egy második szerepük is a Western blot vezérlőként. Használhatók annak ellenőrzésére, hogy a gélről a membránra egyenletes átvitel történt-e az egész gélen. Ez elengedhetetlen, ha a fehérje expressziós szintjeit összehasonlítjuk a minták között.
Hogyan használja a betöltésvezérlőt Western blotban?
A betöltési vezérlőkből származó jeleket általában használják a kérdéses fehérjék jeleinek normalizálására. Ahhoz, hogy ezekre a célokra terhelési kontrollt használjunk, a kontroll fehérje antitesttel és a kísérleti antitesttel végzett kimutatást ugyanazon a bloton kell elvégezni. Számos különböző fehérjét használnak betöltési kontrollként.
Miért használják az aktint töltésvezérlőként?
Béta-aktin, általában a Western Blot betöltési vezérlőjeként használatos.normalizálja a kimutatott fehérjeszinteket annak megerősítésével, hogy a fehérjeterhelés azonos a gélben.