Ha azonban az emissziós spektrumok átfedésben vannak, egynél több fluorokróm fluoreszcenciája is észlelhető. A spektrális átfedés korrigálására fluoreszcencia kompenzációs eljárást alkalmaznak. Ez biztosítja, hogy egy adott detektorban észlelt fluoreszcencia a mért fluorokrómból származik.
Miért van szükségünk kompenzációra az áramlási citometriában?
Kompenzáció szükséges az áramlási citometriás kísérlethez a fluoreszcencia fizikája miatt. A fluorokróm gerjesztett, és fotont bocsát ki különböző hullámhosszúságú tartományban. A fotonok egy része egy második detektorba ömlik, így az egyszeri festett minták kétszeresen pozitívnak tűnnek.
Mi a fő célja a kompenzáló cella használatának?
Az elsődleges cél a valódi fluoreszcencia mérésének lehetővé tétele az elsődleges csatornában, amelyet a szomszédos fluoroforok átgyűrűzése szennyezett. Ezért a kompenzáció korrigálja a fluoroforok közötti fluoreszcencia „behatolást”. Azonban nem tökéletes, és nem tudja kijavítani az összes nemkívánatos hatást.
Mi az a kompenzációs mátrix?
A kompenzációs mátrixot egyszínű fluoreszcens vezérlőfájlok segítségével számítják ki, amelyeket az ImageStream vagy a FlowSight gyűjtöttek össze, az összes csatornát összegyűjtve, fényes tér megvilágítás vagy SSC hiányában.
Mi az a spektrális kompenzáció?
Spektrális felhasználása kompenzáció azt jelenti, hogy a nem elsődleges érzékelők jelét továbbra is használják a markerek valódi jelének fokozására, ahol lehetséges. Az elsődleges kontrollminták a paraméterek elnevezésére szolgálnak. … Az elsődleges detektorokhoz használt minták szintén segítenek elnevezni ezeket a paramétereket a spektrális kompenzáció után.
