A Western-blotokhoz generált denzitometriás adatokat gyakran használják a minták közötti fehérjebőség összehasonlítására. … Nemlineáris denzitometriás adatokat figyeltek meg, amikor Western blotokat infravörös fluoreszcenciával vagy kemilumineszcenciával detektáltak, és különböző SDS-PAGE körülmények között.
Mi az a denzitometriás elemzés?
A denzitometria az optikai sűrűség kvantitatív mérése fényérzékeny anyagokban, például fotópapírban vagy fényképészeti filmben, a fény hatására.
Hogyan használja a denzitometriát a J képen?
Denzitometria ImageJ
- Kattintson a négyzet közepére, és húzza át a következő sávba. …
- Az utolsó sávhoz ismételje meg az eljárást, de nyomja meg a Ctrl és a 3 billentyűket az utolsó sáv beállításához. …
- Használja a vonal eszközt a vonalak megrajzolásához, hogy kiküszöbölje a sáv hátterét a számításokból. …
- A jelentés lekéréséhez menjen: Elemzés→Gélek→Címkecsúcsok.
Hogyan elemzi a Western blot eredményeit?
Ellenőrizze a mennyiségi meghatározási eszközeit . Futtasson például egy blotot, ahol a sávok 20 µg, 15és 10 µg összes fehérjével vannak feltöltve. Az elemzés után a célsávok relatív mennyiségi értékének 2, 1,5 és 1 értéknek kell lennie. Próbáljon ki különböző kvantifikációs eszközöket és beállításokat, amíg megbízhatóan nem tudja reprodukálni a helyes eredményeket.
Hogyan lehet számszerűsíteni egy Western blotot?
1. lépés: Határozza meg a háttérből kivont értéketa kívánt fehérje sűrűsége (PI) és a normalizáló kontroll (NC). 2. lépés: Határozza meg azt az NC-t, amelyiknek a sűrűsége a legmagasabb. 3. lépés: Ossza el az összes NC-értéket a legmagasabb NC-sűrűség-értékkel, hogy megkapja a relatív NC-értéket.
