Nagyon fontos tisztában lenni azzal, hogy a Western blot segítségével előállított adatokat általában félkvantitatívnak tekintik. Ez azért van, mert a fehérjeszintek relatív összehasonlítását nyújtja, de nem a mennyiség abszolút mértékét.
A Western blot minőségi vagy mennyiségi?
A Western blot megbízható kvantitatív módszer csak akkor, ha figyelembe vesszük a minta tulajdonságait és integritását, az antitest specifitását a célfehérjére, valamint a betöltési protokollokat. Ha gondosan odafigyel a részletekre, elkerülheti a gyakori hibákat, és elkerülheti a Western blot adatok félreértelmezését.
Milyen típusú módszer a Western blot?
A Western blot egy laboratóriumi módszer, amelyet fehérjék keverékéből specifikus fehérjemolekulák kimutatására használnak. Ez a keverék egy adott szövethez vagy sejttípushoz kapcsolódó összes fehérjét tartalmazhat.
Számszerűsíthető a Western blot?
A Western blotokat a célfehérjére specifikus ellenanyagokkal mutatják ki, amelyeket elsődleges antitesteknek neveznek. … Mindazonáltal Western-blot is használható a mintákban lévő fehérjék pontos mennyiségi meghatározására, a fehérje expressziós szintjében bekövetkezett változások értékelésére (2).
A Western blot segítségével számszerűsíthető a fehérjék mennyisége?
A sejtek lízise után meg kell határozni a minta teljes fehérjekoncentrációját. A minta pontos mennyiségi meghatározása lehetővé teszi a betöltésétmegfelelő mennyiségű fehérje minden sávban.
