A restrikciós emésztés terméke könnyen tárolható -20 C-on. 4 C-on rendben is lenne, de azért, hogy ne legyen aktivitás és csillagaktivitás ajánlott -20 C-on tartani.
Hogyan tárolja az emésztett DNS-t?
Próbálja a gélszeletet egy éjszakán át a hűtőszekrényben tárolni, vagy olvassa fel a szeletet pufferben, és fagyasztja le -20°C-on vagy -80°C-on. A DNS lebomlása ugyanolyan sebességgel és ugyanolyan körülmények között megy végbe, mint az oldható DNS, ezért a hosszabb tároláshoz használjon hidegebb hőmérsékletet.
Mit jelent az, hogy egy plazmidot meg kell emészteni?
A megtisztított plazmid DNS-t 1 vagy több restrikciós enzimmel (RE) emésztjük úgy, hogy különálló DNS-sávmintázatot kapjunk, amely elektroforézissel könnyen felbontható. … Általában azokat a restrikciós enzimeket választják ki, amelyek a többszörös klónozási helyen (MCS) belül vágnak, és 2-5 könnyen felbontható sávból álló diagnosztikai mintát eredményeznek.
Hogyan tárolja a linearizált plazmidokat?
Ha aggódik a TE downstream hatásai miatt, tárolja a DNS-t nagyobb koncentrációban, és szükség esetén hígítsa meg, vagy használjon "alacsony TE-t", ami 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. ha a DNS vagy az RNS tiszta, akkor -20 C-on sok hónapig tárolható minden lebomlás nélkül.
Meddig tarthatja fenn a korlátozási kivonatot?
Pro-Tip Az alkalmazástól és a reakcióban lévő DNS mennyiségétől függően az inkubációs idő 45 perctől egy éjszakáig terjedhet. Diagnosztikai kivonatok esetén 1-2 óragyakran elegendő. A klónozáshoz használt >1 µg DNS-t tartalmazó emésztések esetén javasolt legalább 4 órán át emészteni.
