Inkubálja az edényt szobahőmérsékleten 2-3 percig . A szilárdan tapadó sejtek gyorsan leválaszthatók 37 °C-on. Figyelje meg a sejteket mikroszkóp alatt. A levált sejtek lekerekítettnek és fénytörőnek tűnnek mikroszkóp alatt.
Mi történik, ha túl sokáig tripszinezi a sejteket?
A túl magas tripszinkoncentrációjú sejtek túl hosszú ideig tartó inkubálása károsodást okoz a sejtmembránokban és elpusztítja a sejteket. Ha nem biztos abban, hogy milyen koncentrációban kell használni a tripszint, használjon alacsony koncentrációt.
Hogyan tripszinizálja a sejteket?
A sejteket a sejtszuszpenzió gyengéden pipettázásával újraszuszpendálhatja, hogy széttörje a csomókat. Szükség esetén további hígítás végezhető a sejtszám és/vagy a továbbtenyésztés céljából.
Mennyi ideig tart, amíg a sejtek csatlakoznak?
az első sejtek már 3-5 perc után tapadnak! Tapasztalataim szerint a legtöbb EC-t 10-20 perc után csatolták. De minél tovább vár, annál erősebb a ragaszkodás.
Rossz a sejteket két egymást követő napon tripszinezni?
Igen káros, ha 24 óra hasadás után folyamatosan tripszinezi a sejtjeit. A hasítást 48 óra hasítás után célszerű elvégezni. … A sejteket addig karbantarthatja, amíg a morfológia jó nem lesz (a sejttípustól függ, egyes sejtek akár 80, mások pedig 10 passzálást is elérhetnek).
